Linfomas
El diagnóstico de linfomas malignos es una de las tareas más difíciles en la histopatología. La detección de clonalidad mediante análisis molecular por PCR de reordenamientos de los genes de las inmunoglobulinas (Ig) y TCR, es un instrumento de gran valor en el diagnóstico de los procesos linfoproliferativos B y T.
Los reordenamientos para Ig y TCR se dan en las regiones hipervariables de dichos genes, cada linfocito maduro presenta un reordenamiento específico con una longitud y secuencia únicas en estas regiones. Por tanto si lo que se amplifica es el ADN de una población linfoide normal o reactiva, el resultado serán múltiples fragmentos dentro de un rango de tamaño determinado, con una distribución Gaussiana. Cuando se amplifica ADN procedente de un proceso tumoral, clonal, todos los fragmentos resultantes serán idénticos en secuencia y tamaño, obteniéndose una banda o pico único mayoritario.
Máster Diagnóstica ha desarrollado un panel de PCR para la detección de reordenamientos del gen en los linfomas para diagnóstico in vitro.
Características de los Kits:
- Contiene dos mezclas de reacción multiplex (Mix A , Mix B, ect...) de las varias regiónes a analisar y un control interno (CI) de amplificación, para comprobar la calidad del ADN.
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Las mezclas de amplificación se presentan en formato “monotest” en tubos de PCR de 0.2ml, identificados con diferente color.
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Todas las mezclas de PCR incluyen cebadores marcados en su extremo 5’ con el fluorocromo 6-FAM, lo que permite hacer un análisis automático de fragmentos por electroforesis capilar en GeneScan.
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Todas las amplificaciones se pueden realizar con un único programa en el termociclador.
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La enzima Phire® Hot Start II ADN Polimerasa es suministrada en el kit.
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Se incluyen controles positivos de ADN clonal y Policlonal.
Análisis Molecular del Gen TcrGamma
Este kit permite detectar la presencia de clonalidad en procesos linfoproliferativos de origen T, mediante la amplificación de los segmentos reordenados VJ del gen TCRgamma. Dada la diversidad de secuencias de estos genes TCR, se emplean múltiples cebadores dirigidos frente a regiones conservadas que flanquean los segmentos V y J, con objeto de detectar el mayor número posible de reordenamientos clonales.
Análisis Molecular del Gen IgH
Este kit permite detectar la presencia de clonalidad en procesos linfoproliferativos de células B, mediante la amplificación de los segmentos reordenados VDJ de la región hipervariable de la cadena pesada de las inmunoglobulinas (IgH), empleando múltiples cebadores consenso que hibridan con regiones conservadas dentro de dichos genes.