Kits para análisis de mutaciones por PCR en Tiempo Real para el área de Oncología y Genotipificación para el área de Farmacogenómica por PCR en tiempo real.

Kits para análisis de mutaciones por PCR en Tiempo Real para el área de Oncología:

KRAS Mutation Analysis Kit (exones 2,3 y 4)
KRAS/BRAF Mutation Panel Analysis Kit (exones 2,3 y 4 de KRAS y V600E de BRAF)
NRAS Mutation Analysis Kit (exones 2,3 y 4)
RAS Mutation Screening Panel (para detección de mutaciones en los exones 2,3 y 4 de KRAS y NRAS)
BRAF V600E Mutation Analysis Kit

BRAF Codon 600 Mutation Analysis Kit (V600E/K/D)
BRAF Codon 600 Mutation Analysis Kit II (V600E/K/D/R/M)
EGFR Mutation Analysis Kit (exones 18,19,20 y 21)
ALK Resistance Mutation Analysis Kit (para la detección de L1152R, C1156Y, F1174L y L1196M) 
GIST Mutation Screening Panel
(para la detección de mutaciones en el gen c-KIT y PDGFRA)
c-KIT Mutation detection Kit
PIK3CA Mutation Detection Kit  
AKT1 E17K Mutation Analysis Kit 
Thyroid Cancer Mutation Detection Kit
(para detección de mutaciones en el gen BRAF y RAS) 
Thyroid Cancer Fusion Gene Detection Kit
(para la deteccion de la fusión de los genes RET & PAX8)

Kits para genotipificación por PCR en Tiempo Real para el área de Farmacogenómica:


DPYD*2A: Ensayo de toxicidad al 5-Fluorouracilo
UGTA1*28: Ensayo de toxicidad al Irinotecan



Productos

K-Ras/B-Raf Mutation Analysis Kit
Nombre del Producto/DescripciónNo. of TestsProduct Code
K-Ras Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR (exons 2, 3 and 4) 50 KRAS-RT50
K-Ras/B-Raf Mutation Analysis Panel Kit for Real-Time PCR (exons 2, 3 and 4 of KRAS and V600E of BRAF) 50 KRBR-RT50
B-Raf V600E Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR 50 BRAF-RT50


Mutaciones de KRAS/BRAF y Cáncer


El gen KRAS codifica para una pequeña GTPasa que juega un rol central en la transducción de señales desde el Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico a efectores corriente abajo.
Las mutaciones de KRAS han sido halladas comúnmente en varios tipos de cánceres humanos, tales como cáncer colorectal metastásico (mCRC), adenocarcinoma de pulmón y cáncer de tiroides. La mayoría de las mutaciones más comunes son halladas en los codones 12, 13 y 61.

Varios estudios han demostrado que los tumores que portan algunas de estas formas mutantes en el gen KRAS son menos respondedores a la terapia con anticuerpos monoclonales anti-EGFR.
La ASCO (American Society of Clinical Oncology) recientemente ha llevado a cabo su primera Opinión Clínica Provisional (PCO), sugiriendo hacer el screening de las mutaciones de KRAS para todos aquellos pacientes que van a recibir la terapia con los anticuerpos monoclonales anti-EGFR (Ej: Cetuximab, Panitumumab y Erlotinib).

Estudios recientes han demostrado que no todos los pacientes con mCRC con KRAS wild-type responden a la terapia anti-EGFR. Esto sugiere que genes y/o vías de señalización adicionales pueden estar implicados en el mecanismo de resistencia a estas drogas. Las mutaciones en BRAF, otro efector corriente abajo de la via EGF activada, ha sido identificada en un 8% de pacientes con mCRC y muestran resistencia a la terapia anti-EGFR. Estos pacientes también tienen una disminución de la supervivencia libre de progresión (SLP) y sobrevida global (SG) cuando son tratados con antagonistas del EGFR.

Estos hallazgos sugieren que el screening de las mutaciones de KRAS y BRAF son necesarios para identificar con exactitud células tumorales que no responderán a las drogas anti-EGFR.

Procedimiento y análisis

El kit para análisis de mutaciones de los genes KRAS/ BRAF es una reacción de PCR en Tiempo Real que usa sondas alelo específicas para identificar la presencia de las mutaciones de KRAS en los exones 2, 3 y 4 y la mutación de BRAF V600E. El procedimiento implica 4 pasos simples:
* Purificación de DNA de biopsias tumorales, tejidos fijados y embebidos en parafina (FFPE), tejidos tumorales frescos ó líneas celulares tumorales.
* Amplificación de las regiones de los genes KRAS y BRAF usando sondas alelo-específicas.
* Detección del producto de amplificación por PCR en Tiempo Real: requiere un equipo de PCR en Tiempo Real capaz de detectar los fluorocromos FAM y VIC.
* Registro e interpretación de los resultados.
Este test puede ser completado en 2 horas aproximadamente a partir de DNA purificado para obtener un resultado.

K-Ras/B-Raf Mutation Analysis panel Kit es para Uso en Investigación (RUO). Descargar folleto
K-Ras Mutation Analysis Kit
Nombre del Producto/DescripciónNo. of TestsProduct Code
K-Ras Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR (exons 2, 3 and 4) 50 KRAS-RT50
K-Ras/B-Raf Mutation Analysis Panel Kit for Real-Time PCR (exons 2, 3 and 4 of KRAS and V600E of BRAF) 50 KRBR-RT50
B-Raf V600E Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR 50 BRAF-RT50


Mutaciones de KRAS/BRAF y Cáncer


El gen KRAS codifica para una pequeña GTPasa que juega un rol central en la transducción de señales desde el Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico a efectores corriente abajo.
Las mutaciones de KRAS han sido halladas comúnmente en varios tipos de cánceres humanos, tales como cáncer colorectal metastásico (mCRC), adenocarcinoma de pulmón y cáncer de tiroides. La mayoría de las mutaciones más comunes son halladas en los codones 12, 13 y 61.

Varios estudios han demostrado que los tumores que portan algunas de estas formas mutantes en el gen KRAS son menos respondedores a la terapia con anticuerpos monoclonales anti-EGFR.
La ASCO (American Society of Clinical Oncology) recientemente ha llevado a cabo su primera Opinión Clínica Provisional (PCO), sugiriendo hacer el screening de las mutaciones de KRAS para todos aquellos pacientes que van a recibir la terapia con los anticuerpos monoclonales anti-EGFR (Ej: Cetuximab, Panitumumab y Erlotinib).

Estudios recientes han demostrado que no todos los pacientes con mCRC con KRAS wild-type responden a la terapia anti-EGFR. Esto sugiere que genes y/o vías de señalización adicionales pueden estar implicados en el mecanismo de resistencia a estas drogas. Las mutaciones en BRAF, otro efector corriente abajo de la via EGF activada, ha sido identificada en un 8% de pacientes con mCRC y muestran resistencia a la terapia anti-EGFR. Estos pacientes también tienen una disminución de la supervivencia libre de progresión (SLP) y sobrevida global (SG) cuando son tratados con antagonistas del EGFR.

Estos hallazgos sugieren que el screening de las mutaciones de KRAS y BRAF son necesarios para identificar con exactitud células tumorales que no responderán a las drogas anti-EGFR.

Procedimiento y análisis

El kit para análisis de mutaciones de los genes KRAS es una reacción de PCR en Tiempo Real que usa sondas alelo específicas para identificar la presencia de las mutaciones de KRAS en los exones 2, 3 y 4. El procedimiento implica 4 pasos simples:
* Purificación de DNA de biopsias tumorales, tejidos fijados y embebidos en parafina (FFPE), tejidos tumorales frescos ó líneas celulares tumorales.
* Amplificación de las regiones de los genes KRAS usando sondas alelo-específicas.
* Detección del producto de amplificación por PCR en Tiempo Real: requiere un equipo de PCR en Tiempo Real capaz de detectar los fluorocromos FAM y VIC.
* Registro e interpretación de los resultados.
Este test puede ser completado en 2 horas aproximadamente a partir de DNA purificado para obtener un resultado.

K-Ras Mutation Analysis panel Kit es para Uso en Investigación (RUO).
NRAS Mutation Analysis Kit (NRAS-RT50)
 Nombre del Producto/DescripciónNo. de TestsCodigo del Producto 
NRAS Mutation Detection Kit 50 NRAS-RT50


NRAS es un miembro de la familia de GTPasas RAS y juega un rol central en la via de señalización de la MAPK.

Las mutaciones activantes en el exón 2 (codon 12/13), exón 3 (codon 61) y exón 4 (codón 146) han sido hallada en varios tumores malignos, incluído melanoma (13-25%), cáncer colorectal (1-6%), cáncer de pulmón (1%), carcinoma hepatocelular (10%), leucemias mieloides (14%), y carcinoma de tiroides (7%).

Procedimiento y análisis

El kit para el análisis de mutaciones del gen NRAS es una reacción de PCR en Tiempo Real que usa primers alelo específicos para identificar la presencia de las mutaciones de NRAS en los exones 2, 3 y 4. El procedimiento implica 4 pasos simples:
* Purificación de DNA de biopsias tumorales, tejidos fijados y embebidos en parafina (FFPE) ó tejidos tumorales frescos.
* Amplificación de las regiones del gen NRAS usando primers alelo-específicos.
* Detección de los productos de amplificación por PCR en Tiempo Real capaz de detectar los fluorocromos FAM y VIC.
* Registro e interpretación de los resultados.
Este test puede ser completado en 2 horas aproximadamente a partir de DNA purificado para obtener un resultado.

NRAS Mutation Analysis panel Kit es para Uso en Investigación (RUO).

Descargar folleto
B-Raf Codón 600 Mutation Analysis Kit
Nombre del Producto/DescripciónNo. of TestsProduct Code
B-Raf Codon 600 Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR (V600E/K/D) 64 BRAFM-RT64
B-Raf V600E/K/D/R/M Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR 64 BRAFX-RT64



El gen BRAF codifica para una serina/treonina proteína kinasa, la cual juega un rol en la vía de señalización MAP Kinasa/ERK, afectando el crecimiento y la proliferación celular. Mutaciones somáticas en este gen han sido halladas en varios cánceres incluyendo Linfoma No-Hodgkin, cáncer colorectal, melanoma, carcinoma papilar de tiroides, carcinoma de pulmón de células no pequeñas y adenocarcinoma de pulmón.


La mayoría de las mutaciones más comunes de BRAF ocurren en el codón 600, donde la sustitución de un aminoácido en el segmento de activación del dominio kinasa crea una proteína activada en forma constitutiva.
Las mutaciones en BRAF son generalmente halladas en tumores que son wild- type para K-Ras, N-Ras y EGFR. Procedimiento y Análisis

La siguiente tabla describe las mutaciones detectadas por este kit y su frecuencia:

Nombre de la Mutación Cambio de NucleótidoCambio de AminoácidoFrecuencia
V600E c.1799T>A Valine (V) to glutamic acid (E) 70-90%
V600K c.1798_1799GT>AA Valine (V) to lysine acid (K) 10-15%
V600D c.1799_1800TG>AT Valine (V) to aspartic acid (D) <5%
V600R* c.1798_1799GT>AG Valine (V) to arginine (R) <5%
V600M* c.1798G>A Valine (V) to methionine (M) <1%
*Disponible solamente en el kit BRAFX-RT64

El kit para el análisis de las mutaciones del codón 600 de BRAF es una reacción de PCR en Tiempo Real que usa primers alelo específicos para identificar la presencia de las mutaciones BRAFV600E, V600K y V600D (V600R y V600M incluidas en el kit BRAFX-RT64). El procedimiento implica 3 pasos simples:
* Purificación de DNA de biopsias tumorales, tejidos fijados y embebidos en parafina (FFPE) ó tejidos tumorales frescos.
* Amplificación de las regiones del gen BRAF usando sondas alelo-específicas.
* Detección del producto de amplificación por PCR en Tiempo Real: requiere un equipo de PCR en Tiempo Real capaz de detectar los fluorocromos FAM y VIC.
Este test puede ser completado en 2 horas aproximadamente a partir de DNA purificado para obtener un resultado.

B-Raf Codón 600 Mutation Analysis Kit es para Uso en Investigación (RUO). Descargar folleto
B-Raf Codon 600 Mutation Analysis Kit II
Nombre del Producto/DescripciónNo. of TestsProduct Code
B-Raf Codon 600 Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR (V600E/K/D) 64 BRAFM-RT64
B-Raf V600E/K/D/R/M Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR 64 BRAFX-RT64



El gen BRAF codifica para una serina/treonina proteína kinasa, la cual juega un rol en la vía de señalización MAP Kinasa/ERK, afectando el crecimiento y la proliferación celular. Mutaciones somáticas en este gen han sido halladas en varios cánceres incluyendo Linfoma No-Hodgkin, cáncer colorectal, melanoma, carcinoma papilar de tiroides, carcinoma de pulmón de células no pequeñas y adenocarcinoma de pulmón.


La mayoría de las mutaciones más comunes de BRAF ocurren en el codón 600, donde la sustitución de un aminoácido en el segmento de activación del dominio kinasa crea una proteína activada en forma constitutiva.
Las mutaciones en BRAF son generalmente halladas en tumores que son wild- type para K-Ras, N-Ras y EGFR. Procedimiento y Análisis

La siguiente tabla describe las mutaciones detectadas por este kit y su frecuencia:

Nombre de la Mutación Cambio de NucleótidoCambio de AminoácidoFrecuencia
V600E c.1799T>A Valine (V) to glutamic acid (E) 70-90%
V600K c.1798_1799GT>AA Valine (V) to lysine acid (K) 10-15%
V600D c.1799_1800TG>AT Valine (V) to aspartic acid (D) <5%
V600R* c.1798_1799GT>AG Valine (V) to arginine (R) <5%
V600M* c.1798G>A Valine (V) to methionine (M) <1%
*Disponible solamente en el kit BRAFX-RT64

El kit para el análisis de las mutaciones del codón 600 de BRAF es una reacción de PCR en Tiempo Real que usa primers alelo específicos para identificar la presencia de las mutaciones BRAFV600E, V600K y V600D (V600R y V600M incluidas en el kit BRAFX-RT64). El procedimiento implica 3 pasos simples:
* Purificación de DNA de biopsias tumorales, tejidos fijados y embebidos en parafina (FFPE) ó tejidos tumorales frescos.
* Amplificación de las regiones del gen BRAF usando sondas alelo-específicas.
* Detección del producto de amplificación por PCR en Tiempo Real: requiere un equipo de PCR en Tiempo Real capaz de detectar los fluorocromos FAM y VIC.
Este test puede ser completado en 2 horas aproximadamente a partir de DNA purificado para obtener un resultado.

B-Raf Codón 600 Mutation Analysis Kit II es para Uso en Investigación (RUO).

EGFR Mutation Analysis Kit

NOMBRE DEL PRODUCTO/DescripCion

No. DE Tests

CoDIGO DEL PRODUCTO

EGFR Mutation Analysis Kit for Real-Time PCR

52

EGFR-RT52

 

El receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico es una proteína de membrana que juega un rol central en la transmisión de señales que promueven el crecimiento y la proliferación celular.
Su dominio Tirosina Quinasa activa numerosos efectores downstream que lleva a la activación de la vía RAS-RAF –MAPK.
La sobreexpresión y mutaciones oncogénicas que activan constitutivamente el dominio tirosina kinasa del EGFR han sido encontradas en varios tumores sólidos.
Además, una excesiva activación del EGFR ha sido demostrada estar asociada con estadíos avanzados del cáncer y a un pobre pronóstico.


Procedimiento y Análisis

EGFR Mutation Analysis kit está basado en la metodología de PCR en Tiempo Real que usa sondas específicas para identificar la presencia de mutaciones del EGFR. El procedimiento consta de 3 pasos simples:
* Purificación de DNA de biopsias tumorales, tejidos embebidos y fijados en parafina (FFPE), tejido fresco ó líneas celulares tumorales.
* Puesta en marcha de la PCR con los reactivos incluídos en el kit.
* Amplificación (8 reacciones por muestra) y detección usando un equipo de PCR en Tiempo Real capaz de detectar los fluorocromos FAM y VIC.


Especificaciones:

EGFR Mutation Analysis kit detecta las siguientes mutaciones de EGFR:

 

Exon 18

  • G719A – 2156G>C
  • G719S – 2155G>A
  • G719C – 2155G>T
  • G719D – 2156G>A

Exon 20

  • T790M – 2369C>T
  • S768I – 2303G>T
  • 2307-2308 ins GCCAGCGTG
  • 2319-2320 ins CAC
  • 2310-2311 ins GGT

Exon 19

  • 2235-2249 del 15
  • 2235-2252>AAT del 18
  • 2236-2253 del 18
  • 2237-2251 del 15
  • 2237-2254 del 18
  • 2237-2255>T del 19
  • 2236-2250 del 15
  • 2238-2255 del 18
  • 2238-2248>GC del 11
  • 2238-2252>GCA del 15
  • 2233-2247 del 15
  • 2234-2248 del 15
  • 2235-2246 del 12
  • 2235-2248>AATTC
  • 2235-2251>AATTC
  • 2235-2252>AAT
  • 2235-2255>AAT
  • 2236-2248>AGAC
  • 2236-2248>CAAC
  • 2236-2256 del 21
  • 2237-2252>T
  • 2239-2247 del 9
  • 2239-2256 del 18
  • 2239-2248>C del 10
  • 2239-2258>CA del 20
  • 2240-2251 del 12
  • 2240-2257 del 18
  • 2240-2254 del 15
  • 2239-2251>C del 13
  • 2237-2253>TC
  • 2237-2253>TTCCT
  • 2237-2253>TTGCT
  • 2237-2256>TC
  • 2237-2256>TT
  • 2237-2257>TCT
  • 2238-2252 del 15
  • 2239-2252>CA
  • 2239-2253 del 15
  • 2239-2256>CAA
  • 2239-2257>T
  • 2239-2262 del 24
  • 2246-2260 del 15
  • 2248-2273>CC
  • 2252-2275 del 24
  • 2252-2276>A
  • 2252-2277>AT
  • 2253-2276 del 24
  • 2254-2277 del 24

Exon 21

  • L858R – 2573T>G
  • L861Q – 2582T>A

Limitaciones

EGFR Mutation Analysis kit requiere 40-80 nanogramos de DNA genómico (5-10 nanogramos por reacción) y puede detectar hasta un nivel de mutación < al 1%. Esta sensibilidad depende en gran parte de la extensión de la fragmentación y calidad del DNA purificado. 

Equipos y materiales 

EGFR Mutation Analysis kit requiere un equipo de PCR en tiempo real capaz de detectar las sondas marcadas con los fluoróforos FAM y VIC. 
Este test incluye los reactivos necesarios para la amplificación/detección por PCR y los controles de reacción validados. Las columnas y reactivos para la purificación del DNA no estan incluidos. 

EGFR Mutation Analysis Kit es para uso en Investigación (RUO).


 

Descargar folleto
EML4-ALK Fusion Gene Detection Kit
Nombre del Producto/DescripciónNo. deTestsCódigo del Producto
EML4-ALK Fusion Gene Detection Kit 46 ALKFG-RT46


Las traslocaciones cromosómicas involucradas en el gen de la kinasa del linfoma anaplástico, han sido halladas en varios cánceres, incluyendo 3-7% de carcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC). Estos cambios en el marco de lectura por la fusión del dominio kinasa de ALK con otros genes, producen una proteína quimérica con potencial oncogénico.

Recientemente se desarrollaron inhibidores de quinasas cuyo target son el dominio kinasa de ALK, los cuales son frecuentemente usados para los pacientes con NSCLC positivos para la fusión de ALK.

Características del ensayo:

El EML4-ALK Fusion Gene Detection Kit provee los reactivos para la detección de 9 variantes de fusión de genes EML4-ALK que han sido encontradas en varios tumores de pulmón. El ensayo combina la síntesis de cDNA por transcripción reversa y amplificación simultánea de las variantes mutadas de ALK y genes de referencia en un solo paso.

El kit detecta 7 variantes (1, 2, 3a/b, 5a/b, & 6) en una reacción, pero no las distingue entre ellas, y 2 variantes (4 & 7) en una segunda reacción, pero no las distingue entre ellas.

Este kit es compatible con varios tipos de muestras y puede ser usado para detectar mutaciones en RNA purificado de líneas celulares, tejido tumoral fresco y tejidos embebidos en formalina y fijados en parafina (FFPE).

Especificaciones:

El EML4-ALK Fusion Gene Detection Kit detecta las siguientes mutaciones de ALK:

  • variant 1 (E13;A20)
  • variant 2 (E20;A20)
  • variant 3a (E6;A20)
  • variant 3b (E6;insA20)
  • variant 4 (E14;(-49)A20)
  • variant 5a (E2;A20)
  • variant 5b (E2;(+117)A20)
  • variant 6 (E13;(+69)A20)
  • variant 7 (E14;(-13)A20)

Equipos y materiales:

El EML4-ALK Fusion Gene Detection Kit requiere un equipo de PCR en Tiempo Real capaz de detectar sondas marcadas con los fluoróforos FAM y VIC. Este kit provee la mezcla de primers/sondas para la detección de las 9 variantes, la enzima one-step para la síntesis de Cdna y PCR, como también los controles validados. Las columnas y reactivos para la purificación de RNA no están incluídos.

 

El EML4-ALK Fusion Gene Detection Kit es para uso en Investigación (RUO)

Descargar folleto
Thyroid Cancer Mutation Analysis Panel

Mutaciones en cáncer de tiroides

El cáncer de tiroides es la neoplasia endócrina más frecuente y se han identificado dos tipos de alteraciones genéticas: mutaciones puntuales en BRAF, KRAS, NRAS ó HRAS y translocaciones entre los cromosomas RET/PTC1, RET/PTC3 ó PAX8/PPAR gamma.

La detección de estos marcadores genéticos permite el diagnóstico definitivo de tumores malignos y distinguirlo de aquellos  nódulos  considerados benignos.

 

Características del kit

 El Thyroid Cancer Mutation Analysis Panel  provee los reactivos para la detección de mutaciones puntuales en los genes BRAF y RAS como también para las variantes de fusión de los genes  RET/PTC1, RET/PTC3 y PAX8/PPAR gamma. El ensayo se realiza en dos corridas: una de ellas es para la detección de las mutaciones puntuales en los genes BRAF y RAS usando DNA genómico y la otra corrida se realiza para la detección de la fusión de genes usando RNA total.

La reacción de detección de la fusión de genes usa una mix de enzima one-step que combina síntesis de cDNA y qPCR en un único paso.

El ensayo está optimizado para ser usado con ácidos nucleicos purificados de muestras incluídas en parafina (FFPE), tejido fresco y muestras de punción-aspiración con aguja fina (PAAF).

El ensayo detecta las siguientes mutaciones:

 

 Equipo y materiales

El Thyroid Cancer Mutation Analysis Panel  requiere un equipo de PCR en Tiempo Real capaz de detectar las sondas marcadas con los fluoróforos FAM y VIC. Este kit incluye la mix de sondas y primers para la detección de todas las mutaciones descriptas , las enzimas y controles validados.

Las columnas y reactivos para purificación de DNA/RNA no están incluídos.

El Thyroid Cancer Mutation Analysis Panel  es para uso en investigación (RUO)

 

 

 

 

Descargar folleto